斯洛伐克的研究人员正在进一步研究PLA在生物3d打印中的用途，并在最近发表的“ 用于骨组织工程的3D打印的基于聚乳酸的多孔支架：一项体外研究 ”中发表了他们的发现。
该团队以PLA支架的形式创建了样品，评估了细胞毒性和生物相容性，其最终目的是组织骨组织工程以协助骨骼再生（最具挑战性的领域之一）。研究人员针对生物3d打印和骨骼再生进行了各种各样的研究，创建了各种结构，支架并使用了不同的打印方法。
PLA以前通常被使用过，而这里的研究人员使用的是商业上可买到的PLA支架，他们将样品分为三个不同的组，每个组都经过以下预处理：
此外，研究小组从细胞毒性和生物相容性方面分析了骨膜来源的细胞。
废旧材料的性质和印刷工艺的性质
支架是使用FFF 3D打印（bq Witbox）创建的，支架样品为10´10´4mm，孔隙率为61％。骨膜取自一名55岁女性患者的胫骨近端，该患者正在接受膝关节置换手术。得到了她的同意，位于科希策的路易斯·巴斯德大学医院伦理委员会批准了这一程序。
“随后，通过在150´g离心7分钟收集细胞，并在25 cm2培养瓶（T25）中接种25,000个细胞/ cm2，该培养瓶含有Alpha修饰的基本必需培养基（美国，Invitrogen，GIBCO®），并添加了10％的胎儿牛血清（FBS，Invitrogen，GIBCO®，美国）和1％的ATB，”研究人员解释说。
5天后，通过更换培养基去除了非粘附细胞。将贴壁细胞在标准培养条件下于37°C的5％CO2湿润气氛中培养，每2-3天更换一次培养基。将汇合的细胞层用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液（美国，Invitrogen）解离，并通过TC10™自动化细胞计数器（Bio-Rad Laboratories）评估细胞的数量和活力。骨膜-来自第三代（P3）的骨祖细胞（PDO）-被用于流式细胞仪分析和与支架的共培养。”
将支架灭菌，然后分成三组：
“第一组在人血清中孵育，第二组在含有Alpha修饰的基本必需培养基的培养基中补充10％FBS和1％ATB，第三组在10％FBS中孵育。”
由FFF技术制备的印刷脚手架，通过计算机断层扫描显示
脚手架的重量输出-脚手架的内部结构：
A）顶视图（119％），B）右视图（167％）
测量细胞四次并与对照组比较。结果产生了良好的生物相容性。然而，研究人员指出，在涂有人血清的支架中效果最好。这种处理还促进了细胞生长。
在与PLA支架共培养期间，骨膜来源的骨祖细胞的增殖分别通过CellTiter96®AQueous One Solution细胞增殖测定法分别在1、6、11和14天后测量。数据代表四个独立测量的平均值±SD值，并且在共同培养的第一天，p的值是p <0.05（*），在共同培养的其他天，p的值是p <0.01（**）
在培养两周的过程中，还使用SEM观察了人类PDO在天然PLA支架上的分布，粘附和增殖。人PDO在支架中显示出良好的生存力，将其在人血清中孵育48小时，这通过增强的细胞扩散和增殖来表达，并且在14天后将支架和细胞共同培养的培养基的pH为7.4。 。研究人员总结说：“ pH值达到了人类血液中pH值。”
“获得的PLA多孔支架有利于骨膜附着祖细胞和增殖，此外，细胞通过间质孔渗入支架，这对于细胞相容性评估很有意义。” 新的策略，例如通过使用支架，愈合促进因子和干细胞的综合疗法，以及最终的三维打印，目前仍处于初步阶段，但可能会在不久的将来提供新的令人兴奋的替代方法。”